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特性說明：

產(chǎn)品描述：

線性化聚乙烯亞胺PEI 25, 000,一種高電荷陽離子聚合物，非常容易結(jié)合于高電荷陰離子基質(zhì)。工業(yè)應用上，線性化PEI可改善負電荷染料的物理外觀，以調(diào)整染料的化學特性和增強染料與固相基質(zhì)的黏附能力，常用作黏附增強劑，作用同多聚賴氨酸(poly-lysine) ；科研應用上,線性化PEI能與DNA或其他負電荷生物大分子簡單結(jié)合，正是這一特性，使得其成為一種非常行之有效的載體運輸介質(zhì)(Vector carrier)，即轉(zhuǎn)染試劑。

在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中，PEI在寬廣的生產(chǎn)規(guī)模內(nèi)(從96孔板到100L生物反應器) 能提供連續(xù)性的高基因表達。

儲存液配制

1) 于1L玻璃燒杯，將1g PEI25K粉末加入900ml Milli-Q? 超純水或其他相當級別的生物用水中。

2) 將磁性轉(zhuǎn)子放入燒杯內(nèi),打開攪拌模式使產(chǎn)生小型漩渦。邊攪拌邊逐滴加入鹽酸(12M) 調(diào)節(jié)pH,直至pH < 2.0.

3) 蓋住燒杯口，持續(xù)攪拌直至粉末完全溶解(溶解時間高達3h)。整個過程pH <2.0. [注意] :可能會存在一些小纖維狀顆粒不能溶解，這是正常現(xiàn)象。

4) 邊攪拌邊逐滴加入NaOH (10M) 調(diào)節(jié)pH，直至到6.9-7.1.

5) 將溶液轉(zhuǎn)入量筒內(nèi)，加入水定容到1L，用一次性0.1-0.2μm PES真空過濾器過濾除菌，即得到1mg/ml的儲存液。

6) 根據(jù)單次用量將儲存液分裝，保存在-20°C,高達1年穩(wěn)定。儲存液再次融化后，可置于4°C保存，高達2周穩(wěn)定,但絕不可重新凍存。

注意事項：

1、對于本品的轉(zhuǎn)染方法可參考以下文獻

1）Durocher, Y., Perret, S. & Kamen, A. High-level and high-throughput recombinant protein production by transient transfection of suspension-growing human 293-EBNA1 cells. Nucleic acids research 30, E9 (2002).

2）Thomas M, Lu J, Ge Q, Zhang C, Chen J, Klibanov AM. (2005). Full deacylation of polyethylenimine dramatically boosts its gene delivery efficiency and specificity to mouse lung. Proc Natl Acad Sci U S A.102(16):5679-84.

3 ) Wulhfard, S., Baldi, L, Hacker, D. L & Wurm, F. Valproic acid enhances recombinant mRNA and protein levels in transiently transfected Chinese hamster ovary cells. Journal of Biotechnology 148, 128 -132 (2010).

4）Baranyi, L. et al. Rapid Generation of Stable Cell Lines Expressing High Levels of Erythropoietin, Factor VII, and an Antihuman CD20 Antibody Using Lentiviral Vectors. Human Gene Therapy Methods 24, 214- -227 (2013).

2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產(chǎn)品僅供科研使用，不可用于臨床診斷應用或其他用途。